10年专注植物组培室定制

企业院校/研究院技术合作企业

全国服务热线: 13585518856 021-57881735
返回列表 返回
列表

植物组织培养一般分为以下几种?

  植物组织培养一般分为以下几种:

  

  1、胚胎培养

  

  指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。

  

  2、器官培养

  

  指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养,如根的根尖和切段,茎的茎尖、茎节和切段,叶的叶原基、叶片、叶柄、叶鞘和子叶,花器的花瓣、雄蕊(花药、花丝)、胚珠、子房、果实等的离体无菌培养。

  

  3、组织培养

  

  指以分离出植物各部位的组织(如分生组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮、皮层、胚乳组织、薄壁组织、髓部等),或已诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养。这是狭义的植物组织培养。

  

  4、细胞培养

  

  指以单个游离细胞(如用果酸酶从组织中分离的体细胞,或花粉细胞,卵细胞)为接种体的离体无菌培养。

  

  5、原生质体培养。

  

  指以除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养。

  

  培养材料的采集

  

  要根据培养目的适当选取材料,选择原则:易于诱导、带菌少。要选取植物组织内部无菌的材料。这一方面要从健壮的植株上取材料,不要取有伤口的或有病虫的材料。另一方面要在晴天,好是中午或下午取材料,决不要在雨天、阴天或露水未干时取材料。因为健壮的植株和晴天光合呼吸旺盛的组织,有自身消毒作用,这种组织一般是无菌的。培养材料的消毒

  

  从外界或室内选取的植物材料,都不同程度地带有各种微生物。这些污染源一旦带人培养基,便会造成培养基污染。因此,植物材料必须经严格的表面灭菌处理,再经无菌操作手续接到培养基上。

  

  试剂

  

  ? 乙醇。

  

  ? 吲哚乙酸( IAA) 或 2 ,4 – D (生长素类似物)。

  

  ? 氯化汞(升汞)或次氯酸钠。

  

  ? 6- 苄基氨基腺嘌呤( 6-BA )

  

  ? MS 培养基

  

  ? 0.1 mol/L NaOH与 0.1 mol/L HCl

  

  配制培养基

  

  ( 1 )愈伤组织诱导培养基: MS 培养基(蔗糖含量为 10 g/L , 2,4 – D 含量为 2 mg/L ,琼脂 10 g/L )。

  

  ( 2 )试验培养基:在 MS 培养基中加入 IAA 和 6–BA 。

  

  吲哚乙酸(IAA)先用少量 0.1 mol/L NaOH 溶解, 6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/L HCl 溶解,然后用蒸馏水稀释,再加入培养基中。

  

  仪器设备

  

  培养室,高压灭菌锅,水浴锅,解剖刀,三角烧瓶( 100mL ),烧杯,量筒,培养皿,棉线,接种箱或超净工作台,分析天平,长镊子,剪刀,容量瓶,移液管,牛皮纸。

  

  培养基灭菌

  

  将配好的培养基加入琼脂加热溶解,调至 pH 5.8 ,趁热分装于 100 mL 三角烧瓶中,每瓶约 20 mL 。待培养基冷却凝固后,用一层称量纸和一层牛皮纸包扎瓶(管)口,并用棉线扎牢,然后在高压灭菌锅中 121 ℃( 1 kg/cm 2 )下灭菌 20 min 。取出三角烧瓶放在台子上,冷却后备用。接种操作所需的一切用具(如长镊子、解剖刀、剪刀等)及灭菌水,需同时灭菌。


咨询

电话

全国服务热线

021-57881735

24小时咨询热线

13585518856

微信

农卉二维码

关注农卉

农卉二维码

农卉官网

邮箱

公司邮箱

kingdomlighting@126.com