植物组织培养目的原理和步骤

　　（一）目的

　　植物组织培养为一基本生物技术。植物之无土繁殖、无病毒植株生产、植物生理、形态、遗传等研究，均可利用比技术为工具。而且具不受限于季节、度地、在小空间即可完成等优点。本实验及利用时地操作，令学生学习相关的知识与技巧。

　　（二）原理

　　利用细胞分化之性，以任何单胞拥有与母本相同的遗传组成，来发育成与母本相同性状的潜能。同理也可解释植物的再生现象，不同植物种类具有不同再生能力，例如：非洲董叶插，可于切口处再生新的植株。而器官发生则是植物于再生的途径中导向根或芽等器官之形成。

　　（三）材料

　　蝴蝶兰或其他植物

　　（四）设备

　　无菌操作台、植物组织切剪器材及捏子、70%酒精、培养皿、恒温箱

　　（五）药品

　　MS培养基

　　（六）步骤

　　1. 首先切取根尖或茎顶等生长点（这会比较好操作）。

　　2. 将取用部位以自来水冲洗，并将杂质蜘蛛网等等，去除乾淨。

　　3. 将其放入1%次氯酸钠含1-2滴展着剂（三角瓶或血清瓶装置），放置超音波震1-2分，而后手摇10分钟。

　　4. 将使用之瓶灌使用70%酒精喷覆其外部，放入无菌操作台内。

　　5. 将瓶口先用火烤过，打开将1%次氯酸钠倒除。

　　6. 用无菌水清洗2-3次，甚至直至乾淨为止。

　　7. 用捏子将果夹取出，放置以消毒过培养皿。

　　8. 利用刀子将切取部位切出约0.5公分之大小，置于无菌培养基上。

　　9. 封好瓶盖，在放置培养室培养。

　　（七）注意事项

　　1. 操作台，先将手清洗乾淨，用酒精消毒。

　　2. 如果操作台，风是向外吹的，在操作过程中，尽量少说话，及头部勿伸入操作台内。

　　3. 手不要挥过以打开之培养器皿及操作器皿。

　　4. 在操作过程中，操作培养皿常换，及刀具每次使用后，用火烤过。

　　5. 手上酒精未乾时，先不要操作，以免烤刀具时，火烧手。

　　6. 接种用的刀、镊子、剪刀等，使用前需用酒精棉花擦拭乾淨，然后在火焰上灼烧。冷却后，在无菌条件下，将器具在95% 酒精中浸一下，取出后放在酒精灯上烧一下，安放在玻璃架上，待冷却后使用。

　　7. 可将刀放在电热杯的开水中煮沸5分钟，冷却后待用。

　　8. 金属用具用酒精棉花擦拭乾淨后，风乾。然后用纸或铝盒，包装好，于高压蒸汽灭菌锅中灭菌，冷却后待用。