牡丹组织培养技术研究现状

　　1992 年河南师范大学的储成才、李大卫首次报道了组培中产生玻璃化现象，并对其产生原因做了初步观察。实验中发现：NAA 、6 一BA 等单独或相互作用均不会诱导牡丹玻璃苗的产生；温度的高低与牡丹玻璃苗的产生有很大的相关性，在26 ℃ 以下没有玻璃苗的产生，在26 一30 ℃ 却有63 ％的牡丹苗发生玻璃化现象，随温度的升高，玻璃化产生的频率也升高。

　　2.2.6 牡丹组培过程中防止褐化的研究

　　褐化问题是牡丹组培过程中的重要瓶颈。北京林业大学李萍等人研究了活性炭、硝酸银、PVPP 和VC4 种防揭剂对牡丹品种‘乌龙捧盛’组培中褐化控制的作用及对组培苗生长和增殖的影响。结果表明：褐化集中发生在转接后4d 内。活性炭能有效控制褐化，但长时间处理会抑制组培苗的生长和增殖；继代培养初期在含活性炭2.0g/L的培养基中进行4d 短期处理，不仅能有效控制褐化，还在一定程度上促进了组培苗的生长和增殖。硝酸银1.0 一8.0mg/L能明显减轻褐化，其中10mg/L的效果好并能显著促进增殖；8.0mg/L时组培苗生长量大。PvPP能部分控制褐化，1.0g/L效果较好；低浓度的PVPP 促进组培苗生长，高浓度时促进增殖。VC 控制褐化的效果不佳，且易导致组培苗玻璃化。综合分析认为：牡丹品种‘乌龙捧盛’继代转接时，先在添加活性炭2.0g/L的培养基中培养4d ，然后转人不含活性炭的培养基中，能有效控制褐化和避免活性炭对生长和增殖的负面影响；在培养基中加人硝酸银2.0 mg/L,能在有效控制褐化的同时，促进组培苗生长与增殖，推荐在牡丹组培中应用。

　　3 国外组培技术研究进展

　　3.1 禽伤组织培养

　　在国外早的有关牡丹组培方面的报道partanen及Demoise 和Partanen ( 1969 ）关于愈伤组织的培养，他们通过从牡丹种子剥离的合子胚诱导出愈伤组织。cildow 和MiteheU 用牡丹白化茎为外植体进行组织培养，比较了2SH 和SH 一M 两种培养基的效果，发现含有还原态氮和氧化态氮的SH 一M 培养基更利于愈伤组织的快速生长。

　　3.2 有关胚培养的研究

　　为了改变牡丹种子休眠的习性．国外学者进行了胚培养的研究。据Gildow 和Mitchell 用牡丹白化茎为外植体进行组织培养，比较了ZSH 和SH 一M 两种培养基的效果，发现含有还原态氮和氧化态氮的SH 一M 培养基更利于愈伤组织的快速生长。Wang and van Staden 报道，2 , 4 - D 能促进‘凤丹白’种胚的子叶两端形成愈伤组织。陈怡平等以紫斑牡丹土芽、叶柄、叶片、心皮和雄蕊为材料进行愈伤组织培养，发现愈伤组织诱导中，NAA 的作用大于BA 的作用洲AA 浓度稍高于BA 浓度比较理想；土芽和顶芽的诱导率高，适合作外植体。牡丹组培中，诱导产生愈伤组织比较容易，而由愈伤组织分化不定芽却比较困难，不定芽分化率一般比较低和Mey报道，胚的离体培养可以将萌发时间缩至84 一98d 。Brukbin 和Batygina ( l994 ）用处于不同生长时期的P.anomala 种胚为外植体进行胚培养，发现只有选球状胚阶段之后的胚状体培养才能增殖，取自成熟种子的胚在无激素的MS 和112MS 培养基上均能形成正常的小植株。Julie , Buchheim 等（1994 ）研究GA 3 , ABA , BA对上胚轴的影响，结果表明：GA3 促进上胚轴的生长，ABA 和各种浓度的GA3 配合使用均抑制上胚轴的生长；GA3 和BA 交互作用利于芽的生长；高浓度的GA3 和BA 能生成大量正常的叶片。此外，GA3 能打破上胚轴的休眠，在不含细胞分裂素的培养基上发生的根细长，且有侧根。