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植物组织培养中外植体的选择

  外植体是组织培养中的各种接种材料。包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质等。

  

  植物从低等的藻类到苔藓擅《类、种子植物等高等植物的各类、各部分器官都可作为组织培养的材料,一般裸子植物多采用幼苗、芽、韧皮部细胞,被子植物采用胚、胚乳、子叶、幼苗、茎尖、根、茎、叶、花药、花粉、子房和胚珠等各个部分。因此,外植体的选择需要从植物品种、适当的时期、大小、外植体来源、消毒难易等方面子以考虑。

  

  1.选择的种质及母株

  

  无论是离体培养繁殖种苗,还是进行生物技术研究,培养材料的选择都要从主要的植物入手,选取性状的种质、基因型和生长健壮的无病虫害植株。尤其是进行离体快繁,只有选取的种质和基因型,离体快繁出来的种苗才有意义,才能转化成商品;生长健壮无病虫害的植株及器官或组织代谢旺盛,再生能力强,培养后容易成功。

  

  2.选择适当的时期

  

  植物组织培养选择材料时,要注意植物的生长季节和生长发育阶段,对大多数植物而言,应在其开始生长或生长旺季采样,此时材料内源激素含量高,容易分化,不仅成活率高,而且生长速度快,增殖率高。若在生长末期或已进入休眠期时采样,则外植体可能对诱导反应迟钝或无反应。花药培养应在花粉发育到单核靠边期取材,这时比较容易形成愈伤组织。百合在春夏季采集的鳞茎、片,在不加生长素的培养基中,可自由地生长、分化;而其他季节则不能。植物的腋芽培养,如果存1~2月间采集。则腋芽萌发非常迟缓;而在3~8月间采集,萌发的数目多,萌发速度快。

  

  3.选取适宜的大小

  

  培养材料的大小根据植物种类、器官和目的来确定。通常情况下,快速繁殖时叶片、花瓣等面积为5mm2,其他培养材料的大小为0.5~1.0cm。如果是胚胎培养或脱毒培养的材料,则应更小。材料太大,不易彻底消毒,污染率高;材料太小,多形成愈伤组织,甚至难以成活。

  

  4.外植体来源要丰富

  

  为了建立一个而稳定的植物组织离体培养体系,往往需要反复实验,并要求实验结果具有可重复性。因此,就需要外植体材料丰富并容易获得,一般从野外或温室中选取生长健壮的无病虫害的植株器官或组织作外植体,离体培养容易成功。最好对所要培养的植物各部分器官的分化能力先进行比较,再筛选最易再牛的部位作为最佳外植体,如同一种百合鳞茎的外层鳞片要优于内层鳞片,下段鳞片要优于上、中段鳞片。对多数植物来说,茎尖是较好的选择,但往往数量有限,也可常用茎段、叶片作外植体,如菊花、秋海棠等;还可选择鳞茎、球茎、根茎、花茎、花瓣、根尖、胚等作为外植体进行培养。

  

  5.外植体要易于消毒

  

  在选择外植体时,应尽量选择带杂菌少的器官或组织,降低初代培养时的污染率。一般地上组织比地下组织、一年生组织比多年生组织、幼嫩组织比老龄和受伤组织容易消毒。


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