离体根培养特点:因为根系生长快,代谢强,变异小,加上无菌,不受微生物干扰,可根据研究需要,改变培养的成分来研究其营养吸收、生长和代谢的变化。
应用:研究根系生理和代谢优良;也可由根细胞可再生成植株,不仅证明根细胞的全能性,也产生了无性繁殖系,用于生产实践。
培养方法:
1.培养基 用无机离子浓度低的White培养基,也可用MS、B5等,但浓度为2/3或1/2。
White培养基配方为:硝酸钾80,硫酸镁720,硫酸锰7,硫酸铜0.03,碘化钾0.75,Vpp0.5,VB6 0.1,VB1 0.1,甘氨酸3(mg/L)
2.无性系的建立和培养、应用
1、将种子进行表面消毒,在无菌条件下用湿布培养萌发,至根伸长1.0cm以上。
2、从根尖一端切取长1.2cm的尖,接种于培养基中。用分化培养基。
3、培养物生长甚快,几天后发育出侧根。待侧根生长约一周后,即切取侧根的根尖进行接种培养,如此反复,得到离体根的无性系。
4、这种根可用来进行根系生理生化和代谢方面的实验研究。如营养选择吸收、根尖伸长生长、生长素对伸长的影响等
5、培养条件为暗光、25~27℃。
3、植株再生培养 第一步诱导形成愈伤组织。第二步在再分化培养基上诱导芽的分化、再分化成小植株。